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一、基線噪聲
流動(dòng)相或檢測器中有氣泡時(shí)，要對流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理;檢測器燈有連續(xù)噪聲時(shí)，更換氘燈;出現(xiàn)由污染引起的隨機(jī)噪聲時(shí)，應(yīng)清洗色譜柱、凈化樣品、使用HIPLC級(jí)試劑;偶然有噪聲時(shí)，可能是來自電源的干擾，如果電壓不穩(wěn)時(shí)，應(yīng)采用穩(wěn)壓電源。
二、峰拖尾
色譜柱超載時(shí)，要減少進(jìn)樣量或稀釋樣品或使用高溶量的色譜柱;色譜柱性能不佳時(shí)，更換色譜柱;死體積或柱外體積過大時(shí)，將連接降至zui低，并對所有連接點(diǎn)作合理的調(diào)整，盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接;加入硅羥基，其作用是純化色譜柱，增加緩沖液的濃度，降低流動(dòng)相的pH值，純化樣品;出現(xiàn)峰干擾時(shí)，應(yīng)清潔樣品，調(diào)整流動(dòng)相。
三、峰展寬
進(jìn)樣體積過大時(shí)，用流動(dòng)相配樣;樣品過載時(shí)，進(jìn)小濃度、小體積樣品;在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展時(shí)，進(jìn)樣前后排出氣泡，以降低擴(kuò)散;流動(dòng)相粘度過高時(shí)，提高柱溫，并采用低粘度流動(dòng)相;等度洗脫，保留時(shí)間過長時(shí)，要增加流速或改用梯度洗脫;柱外體積過大時(shí)，將連接管徑和連結(jié)管降至zui小。
四、保留時(shí)間變化
保留時(shí)間的變化有三中情況：波動(dòng)、縮短、延長。
保留時(shí)間出現(xiàn)波動(dòng)時(shí)，應(yīng)檢查柱溫是否處于恒溫狀態(tài)，如果設(shè)置為室溫，氣溫的變化會(huì)引起保留時(shí)間的波動(dòng)，應(yīng)該設(shè)置為恒定溫度;等度和梯度間還沒有充分達(dá)到平衡狀態(tài)時(shí)，應(yīng)該用十倍以上柱體積的流動(dòng)相去平衡色譜柱;緩沖液濃度太低時(shí)，應(yīng)換用>25mmol/L的緩沖液;色譜柱被污染或已經(jīng)接近柱壽命時(shí)，應(yīng)更換保護(hù)柱或換新色譜柱。
保留時(shí)間縮短時(shí)，流速增加，應(yīng)檢查流速的設(shè)定;柱溫高時(shí)，應(yīng)檢查柱的設(shè)置;進(jìn)樣量太大時(shí)，減少樣品用量或降低樣品濃度;流動(dòng)相的組成發(fā)生了改變，比如流動(dòng)相中易揮發(fā)有機(jī)相蒸發(fā)，兩相之間互溶不好，會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)相不均勻或某一相出現(xiàn)部分沉淀;流動(dòng)相的PH值應(yīng)保持3~7.5范圍內(nèi)，否則會(huì)引起柱鍵合相的流失。
保留時(shí)間延長時(shí)，流速減小，應(yīng)檢查流速的設(shè)定和管路是否有泄露;柱溫低時(shí)，檢查柱溫的設(shè)置;流動(dòng)相的組成發(fā)生了改變，比如流動(dòng)相中易揮發(fā)有機(jī)相蒸發(fā)，兩相之間互溶不好，會(huì)導(dǎo)致流動(dòng)相不均勻或某一相出現(xiàn)部分沉淀;檢查流動(dòng)相的pH值是否3~7.5范圍內(nèi)，否則會(huì)引起柱鍵合相的流失。
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